动物源性食品中兽药残留的检测大环内酯类药

大环内酯类药物（macrolides，MALs）是利用放线杆菌或小单孢菌生产的具有大环状内酯环化合物的总称。MALs通过食物链进入人体，对人类健康构成严重威胁，因此MALs在动物源性食品中的残留监测和控制已受到许多国家的高度重视。MALs结构中含有14、15或16元内酯环母核，并通过苷键连接有1～3个中性或碱性糖链（如红霉脱氧糖胺、红霉糖、碳霉糖、海藻糖胺等）。根据内酯环母核中的原子数目，可将临床上最常用的MALs分为三类。红霉素、罗红霉素、克拉霉素是14元，而阿奇霉素为15元，螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素为16元。阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素均为红霉素的衍生物。替米考星由泰乐菌素合成。一般来讲，MALs的解离常数pKa为7.1～9.9。一些抗生素对pH较为敏感，在酸性条件下易降解。另外，有一类多烯类大环内酯类药物具有20～40元大内酯环母核，通过3～8个碳碳双键与糖链相连。38元多烯类大环内酯药物分别是制霉菌素A1（六烯化合物）和两性霉素B（七烯化合物），常用于人医临床。临床和畜牧生产中使用的MALs多属结构中含有氨基取代基的大环内酯类药物（又称碱性MALs），本部分综述了该类药物的理化性质、药理与代谢、国内外限量要求以及残留检测的样品前处理、仪器测定方法等内容，以期为该类药物的全面了解和残留检测提供参考。1理化性质MALs的结构特征是含有一个被高度取代的14元或16元内酯环苷，内酯环通过苷键与1或2个糖链（二甲氨基糖或中性糖）连接。除内酯结构外，苷结构中含有烷基、羟基、氧烷基、环氧基、酮基或醛基，多数还含有共轭二烯或α，β-不饱和酮。所以根据构成内酯环骨架原子数目或紫外吸收特征可对MALs进行分类（表5-6和图5-8）。除主成分外，微生物还产生一些相关的次要组分（图5-8），控制这些亚组分的含量是药品质量监控的重要方面，但残留分析中一般仅选择主成分和（或）其代谢物作为残留标志物。EU已禁止将MALs作为促生长剂使用。MALs的理化性质可概括如下：MALs为无色弱碱性化合物（赛地卡霉素呈中性），相对分子质量较高（～），多呈负旋光性，易溶于酸性水溶液和甲醇、乙腈、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等极性溶剂；在pH6.0～8.0水溶液中相对稳定，抗菌活性最高；但在酸性条件下（pH＜4时）苷键易水解。多数MALs在～nm处存在吸收峰，含有共轭碳碳双键或α，β-不饱和酮结构的药物在此范围内呈现强的紫外吸收，EMR和OLD仅在～nm处呈弱吸收。MALs的叔胺基团可与酸形成盐，其盐溶于水，羟基可被酰化成酯，酮基或醛基能与羰基试剂反应。MALs的盐或酯较游离形式稳定。MALs结构中含有苷羟基、醛基、氨基等还原性基团，可与斐林试剂、茴香醛-硫酸试剂、9-羟基呫吨-盐酸-醋酸试剂发生显色反应，亦可用于建立电化学检测方法。MALs主要为脂溶性分子，易溶于甲醇，在酸性条件下不稳定。MALs为弱碱，pKa为7.4～9.2。2药理与代谢MALs的抗菌作用机制在于干扰菌体蛋白的合成，与敏感菌的核糖体50S亚基结合，作用于P位结合点，抑制转肽酶的催化功能，阻碍mRNA的位移，使肽键不能从A位点转移到P位点，阻碍肽链的生成与延长，从而产生抑菌作用。在一般浓度下主要具有抑菌作用，高浓度时则呈现杀菌作用。MALs的抗菌谱主要为革兰氏阳性菌及某些革兰氏阴性球菌，包括葡萄球菌、粪链球菌、脑膜炎球菌、炭疽杆菌、淋球菌、白喉杆菌、百日咳杆菌、产气梭状芽孢杆菌、布鲁氏菌、弯曲杆菌、钩端螺旋体、肺炎支原体、立克次氏体和衣原体等。MALs属中谱抗生素，对革兰氏阳性菌和支原体具有突出的抗菌活性，对螺旋体、立克次氏体和支原体亦有效。其中ERM对革兰氏阳性菌作用最强，TYL对支原体作用最强。临床上MALs主要用于治疗敏感菌引起的呼吸道、消化道和泌尿生殖道感染，如肺炎、细菌性肠炎、产后感染、乳腺炎等，肌内注射剂量一般为2～50mg/kg。MALs毒性较低，如小鼠静脉注射LD50为～mg/kg，经口LD50为1～mg/kg。食品中MALs残留的主要问题是引起过敏和耐药菌株的扩散。TIL和TYL作为畜禽专用药物，在兽医上被广泛使用，这两种药物在奶牛、奶山羊、绵羊、猪、鸡等动物体内的药动学研究已有报道。Thompson等报道了TIL在拌料给药时猪体内的浓度，按mg/kg、mg/kg添加饲料，连续给药14d后肺组织中药物浓度分别为0.73～1.43μg/mL和1.11～2.59μg/mL。山羊肌内注射TYL（15mg/kg）的药动学参数：分布半衰期h，总清除率6.8mL/（kgmin），消除半衰期为3.04h，cmax为2.38pg/mL，生物利用度为72.6%。3国内外限量要求MALs残留监控中一般选择肝脏作为靶组织，原型药物为残留标志物，如TYL、TIL、ERM、OLD等，个别药物（如SPM）需同时测定代谢产物。近年来，食品安全问题越来越引起人们的广泛

转载请注明：http://www.iparentsbook.com/syjg/9941.html